哈希分光光度計(jì)采用基座和比色皿上樣雙檢測模式，是一款高再現(xiàn)性的全波長分光光度計(jì)。適用于更寬濃度范圍的樣品檢測，操作簡便，不僅可用于測量DNA，RNA純度、濃度，測量蛋白質(zhì)濃度，也可用于一般物質(zhì)分析中的吸光度檢測。它可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光，物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。
哈希分光光度計(jì)常用于定量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA。核酸的更高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一，因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸，事先要選擇對應(yīng)的系數(shù)。如：1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算，從而得出相應(yīng)的樣品濃度。
影響哈希分光光度計(jì)讀數(shù)不穩(wěn)定的根本原因應(yīng)該有兩類：一類是能量降低，信噪比下降，這個(gè)可能性比較大；另一類是信號(hào)接收和處理故障。
1、能量降低
?。?）比色皿
如果是在400nm以下波長測量，需使用石英比色皿，假如使用普通玻璃比色皿會(huì)吸收大部分的紫外能量。還有比色皿一般有光面和毛面之分，毛面是手捏的，光面是對正光路的。
?。?）樣品架
檢查樣品架是否在正確的槽位上，光是否全部照在比色皿上。方法是把波長設(shè)定到550nm左右，這時(shí)是比較明亮的黃綠色光，在樣品室內(nèi)用個(gè)小紙片擋下就能看到光斑。這個(gè)方法也能檢測可見區(qū)的光源是否正常，濾光盤及波長驅(qū)動(dòng)是否正常。
?。?）空白樣品
樣品室不放任何東西對空氣調(diào)零，看是否穩(wěn)定。如果穩(wěn)定的話，應(yīng)該是空白樣品本身吸光度太高了。方法是先對空氣調(diào)零，然后把空白樣品放入光路中看讀數(shù)。如果讀數(shù)很大，例如接近3A，則不可用。
?。?）光源
先確認(rèn)分析波長值，一般紫外可見有2個(gè)光源，紫外區(qū)用氘燈，可見區(qū)用鎢燈，切換點(diǎn)一般在340nm。鎢燈光較為明亮刺眼，氘燈光偏青紫色。如果儀器后面有透光窗口可以直接看，如果沒有的話，需要打開外殼，打開燈室罩。光源都是用壽命的，能量變?nèi)趸蚋纱嗖涣亮?，要換燈。也有比較小的可能是光源供電電路故障，例如電源老化后可能導(dǎo)致無法正常點(diǎn)亮氘燈。
?。?）光路
看光路是否偏了，可以把波長設(shè)定到550nm左右，觀察樣品室內(nèi)有無黃綠色光線，光斑能否正確照在接收器窗口上。確認(rèn)燈室內(nèi)光源光斑是否正確照在單色器入狹縫上，確認(rèn)光路中有無雜物擋住。確認(rèn)單色器內(nèi)反射鏡、透鏡、光柵、濾光片等是否發(fā)霉或積滿灰塵，這個(gè)需要廠家才能處理。
?。?）驅(qū)動(dòng)電路故障
例如濾光盤驅(qū)動(dòng)異常，導(dǎo)致濾光片用錯(cuò)或者干脆光路被遮擋。一般廠家或?qū)I(yè)人員處理。
2、信號(hào)接收和處理故障
接收器（例如光電池或者光電倍增管）、放大電路、AD轉(zhuǎn)換電路等都有可能。這類問題一般由廠家或?qū)I(yè)人員處理，這里不詳細(xì)說明了。
